负染色技术_TEM透射电镜负染色制样

负染色技术（Negative Staining）是一种用于制备透射电子显微镜（TEM）样品的成像技术，旨在通过产生复反差（Reverse Contrast）来增强样品的可见度，主要应用于生物大分子、病毒颗粒及其他颗粒性物质的形貌观察。

该技术的核心原理是利用高电子密度的重金属盐溶液（如磷钨酸、醋酸铀等）对铺展在载网上的样品进行染色处理。在制样过程中，重金属盐在载网背景及样品周围沉积，而样品本身的凸起部位则不沉积染料。因此，在透射电镜下观察时，样品呈现为高亮区域，而背景则呈现为深暗色，从而实现对样品形态的清晰表征。

1. 低电压成像的电压范围是多少？

低电压成像的范围通常为 80-120 kV。

2. 哪些类型的样品通常需要进行负染色处理？

主要用于观察生物类及有机类样品的形貌，例如细菌、病毒、胶束等。

3. 常用的负染色剂有哪些？

常用的染色剂包括磷钨酸（PTA）和醋酸铀（UA）。

4. 低电压模式下可以进行高分辨成像吗？

不可以。由于加速电压较低，电子束能量较小，其分辨率无法达到高分辨成像的要求。

5. 样品的送样要求是什么？

易变质的样品需在低温冷藏条件下运输；病毒、外泌体等样品在送样前需要经过浓缩并进行冷冻处理。