ELISA
简介
ELISA 简介
ELISA,即酶联免疫吸附实验,是一种基于抗原-抗体特异性结合的定量或半定量检测方法。其基本原理是:待测样本中的目标蛋白、细胞因子、激素、抗体或其他生物分子与包被在酶标板上的抗体/抗原结合,再通过酶标二抗或酶标探针催化底物显色,最后用酶标仪检测吸光度值,根据标准曲线计算样本中目标物的浓度。
ELISA 常用于检测血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆、尿液、粪便提取液等样本中的炎症因子、氧化应激指标、免疫球蛋白、激素水平、凋亡相关蛋白和疾病标志物等。
常见检测指标包括:IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β、IFN-γ、CRP、MDA、SOD、GSH-Px、CAT、IgG、IgM、VEGF、EGF、MMPs、TIMP、caspase-3、cAMP、cGMP、胰岛素、皮质酮等。
ELISA 的主要类型
ELISA 根据检测方式不同,可分为以下几类:
夹心 ELISA 是最常用的类型,适合检测细胞因子、蛋白、激素等大分子。它通常使用捕获抗体固定目标物,再用检测抗体识别目标物,因此特异性较高、灵敏度较好。
竞争 ELISA 常用于检测小分子物质、激素、药物残留等。样本中的目标物与酶标抗原竞争结合抗体,通常目标物浓度越高,显色信号越低。
间接 ELISA 常用于检测抗体水平,例如血清中特异性 IgG 或 IgM 抗体。
直接 ELISA 操作相对简单,但灵敏度和特异性通常不如夹心 ELISA