氨基酸成分分析_氨基酸含量测定
简介
全自动氨基酸分析仪利用样品各种氨基酸
组分
的结构不同、酸碱性、极性及分子大小不同,在阳离子交换柱上将它们
分离
,采用不同pH值离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱下来,再逐个与另一流路的
茚三酮
试剂
混合,然后共同流至螺旋反应管中,于一定温度下(通常为115~120℃)进行
显色反应
,形成在570nm有最大吸收的蓝紫色产物。其中的
羟脯氨酸
与
茚三酮反应
生成黄色产物,其最大吸收在440nm。
以下是改写内容:
本分析采用全自动氨基酸分析仪,利用各类氨基酸组分在结构、酸碱性、极性及分子大小上的差异,通过阳离子交换柱实现组分分离。在分析过程中,采用不同pH值和离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱,随后与茚三酮试剂混合,并在螺旋反应管中于115~120℃的特定温度下进行显色反应。除羟脯氨酸外,大多数氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色产物,其最大吸收波长为570nm;而羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色产物,其最大吸收波长为440nm。
案例
常见问题
1、
测试氨基酸的方法?
酸水解,然后色谱柱分离。
2、
氨基酸分析仪可以测试蛋白质含量吗?
只能测氨基酸含量,如果知道蛋白质种类,可以选择定氮的方式做含量。
3、
薄膜测试需要冻干还是湿态好?
冻干的最好。
以下是改写内容:
1. 问:氨基酸成分分析采用什么测试方法?
答:通常采用酸水解法将蛋白质或多肽降解为单体氨基酸,随后利用色谱柱进行分离检测。
2. 问:氨基酸分析仪是否可以用于测定蛋白质含量?
答:氨基酸分析仪仅能测定单体氨基酸的含量,无法直接测定蛋白质总含量。若已知蛋白质种类并需测定其含量,建议采用定氮法进行分析。
3. 问:薄膜样品测试时,应提供冻干状态还是湿态样品?
答:建议提供冻干状态的样品,其测试效果最佳。